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肝素亲和层析 简介

2021年12月16日 16:34 来源:月旭科技(上海)股份有限公司

乳铁蛋白是哺乳动物乳汁中富含的一种非血红素铁结合糖蛋白,且具有强大的生物功能,如抗菌、抗氧化、抗癌、促进肠道发育和铁吸收以及调节免疫系统等。因乳铁蛋白具有优质的生物功能,免疫力低下的人群、患有感染性疾病的人群、具有骨质疏松风险的人群,以及缺铁性贫血人群均对于乳铁蛋白的补充有所需求。

肝素(Heparin)是一种含硫酸酯的酸性多糖,可通过糖苷键与一些结构糖蛋白结合,同时肝素表面的负电荷会与带正电的蛋白质发生离子作用。因此,肝素能和抗凝血因子III、凝血酶、类凝血酶、重组人角质细胞生长因子等生物大分子结合。在合适的缓冲液条件下,乳铁蛋白与肝素可通过糖苷键和离子发生亲和作用,故肝素也可用于纯化乳及乳制品中的乳铁蛋白。

 

月旭科技Heparin Tanrose 6FF/Heparin Tanrose 6HP肝素亲和介质

Heparin Tanrose 6FF/Heparin Tanrose 6HP介质是以琼脂糖为基架,肝素为配基的亲和介质,具有物理及化学稳定性不易脱落、使用寿命长、应用范围广泛的特点。

技术参数


 

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样品纯化过程

 

1

Heparin Tanrose 6FF/Heparin Tanrose HP装入合适的层析柱,层析用5倍柱体积的结合液进行平衡,使填料处于与目的蛋白相同的缓冲体系下,起到保护蛋白的作用。 

2

将样品加到平衡好的Heparin Tanrose 6FF/Heparin Tanrose HP中(保证目的蛋白与Heparin Tanrose 6FF/Heparin Tanrose HP充分接触,提高目的蛋白的回收率),收集流出液。

3

用10-15倍柱体积的洗杂液进行清洗,去除非特异性吸附的杂蛋白,收集洗杂液。

4

使用5-10倍柱体积的洗脱液,收集洗脱液,即目的蛋白组分。

5

依次使用3倍柱体积的结合液和5倍柱体积的去离子水平衡填料,最后再用5倍柱体积的20%的乙醇平衡,然后保存在等体积的20%的乙醇中,置于4度保存,防止填料被细菌污染。

订货信息


 

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关键词: 肝素亲和

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