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多糖涂敷型手性柱（反相流动相）冲洗方法
2022年11月11日 14:46
来源：广州绿百草科学仪器有限公司
当手性色谱柱分离度下降、
柱压过高等色谱柱异常现象发生时，
才需要使用本方法冲洗
1、一般情况下，使用常规方法冲洗色谱柱；若常规方法无效，则使用特殊方法一冲洗色谱柱；若特殊方法一无效，则使用特殊方法二冲洗色谱柱。
2、冲洗过程中，10µm柱柱压请勿超过3Mpa，5µm柱柱压请勿超过6Mpa，3µm柱柱压请勿超过15Mpa。
3、以下冲洗过程中涉及的流速仅供参考，实际操作中以柱压不超过以上说明为宜。
4、以下冲洗过程中提到的20倍柱体积，以4.6*150mm规格柱为例，约为30mL。
常规方法：
1、用水/甲醇或水/乙腈(80/20,v/v或85/15,v/v)，流速0.5ml/min，冲洗20倍柱体积；
2、冲洗结束，验柱或重复以前的样品实验，看是否柱效有提高。
特殊方法一：
1、 用水/甲醇(90/10,v/v)，流速0.5 ml/min，冲洗20倍柱体积；
2、逐渐提高甲醇的比例到100%，然后以甲醇100%，0.3ml/min左右的流速，冲洗20倍柱体积；
3、逐渐增加水的比例至90%，即水/甲醇(90/10,v/v)；
4、冲洗结束，验柱或重复以前的样品实验，看是否柱效有提高。
特殊方法二：
1、用水/甲醇(90/10,v/v)，流速0.5 ml/min，冲洗20倍柱体积；
2、逐渐提高甲醇的比例到100%，然后以甲醇100%，0.3ml/min左右的流速，冲洗20倍柱体积；
3、再用酸性流动相，甲醇/三氟·乙酸(100/0.1,v/v)，0.3ml/min的流速，冲洗20倍柱体积；
4、再用中性流动相甲醇过渡，甲醇100%，0.3ml/min的流速，冲洗20倍柱体积；
5、逐渐增加水的比例到90%，即水/甲醇(90/10,v/v)；
6、冲洗结束，验柱或重复之前的样品实验，看是否有提高柱效。
关键词：
多糖涂敷型手性柱
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