如何正确使用反相色谱柱？

2022年11月14日 09:28 来源：东曹（上海）生物科技有限公司

根据流动相和固定相相对极性不同，液相色谱分为正相色谱和反相色谱。流动相极性大于固定相极性的情况，称为反相色谱。非极性键合相色谱可作反相色谱。

反相色谱柱是一种用于分离分析各种物质的高效液相色谱分离柱。反相色谱柱具有高效、灵敏和选择性好等优点，广泛应用于化工、医药、食品等工业领域以及环保监测等领域。

使用方法：

1.先用正己烷-乙腈（99：1）以0.5ml/min的流速冲10倍柱体积，再依次以相同的流速相同的用量用氯、异丙醇、甲醇、甲醇-水（50：50）冲柱子；

2.以0.5ml/min的流速用30倍柱体积的pH11.0的氢氧化钠（LUNA）水溶液冲柱子（注意pH值切不可超过11.0），立即用水（0.5ml/min的流速，30倍柱体积）冲洗，再换成流动相；

3.配制流动相时，应各组分分别量取，比例较小的组分要精密量取，需调pH值时要精密到0.1；

4.反相条件下使用时，要特别注意控制pH值范围，pH值越低越有发生水解的危险，流动相中水的比例越高当然也越有发生水解的危险。理想的pH范围在pH3.0-7.0；

5.如果要使用的流动相中还含有缓冲盐类，建议在用分析流动相之前，先用不含缓冲盐的同比例流动相过渡，这样可避免缓冲盐在分析柱内的析出。

关键词：反相色谱柱

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