XSELECT HSS XP色谱柱的使用
XSELECT HSS XP色谱柱的使用
为了确保XSelect HSS XP 2.5μm色谱柱始终保持理想性能,请遵循以下原则:
a. 样品制备
1. 样品中的杂质和/或颗粒通常会造成色谱柱污染。避免色谱柱污染的方式之一是使用Waters Oasis™或Sep-Pak™固相萃取(SPE)产品。
2. 优先选用初始流动相条件或更弱的溶剂制备样品,以获得理想的峰形和灵敏度。
3. 如果未使用流动相制备样品,请确保样品、溶剂和流动相可以混溶,以避免样品和/或缓冲液产生沉淀。
4. 用0.2μm滤膜过滤样品,去除颗粒物质。如果用于溶解样品的溶剂中含有机溶剂(如乙腈、甲醇等),请确保滤膜/过滤器材料与该溶剂不相容。或者,可以考虑在8000 rpm下离心样品溶液20 min,然后将上清液转移至适当的样品瓶中。
b. pH范围
温度、流动相pH值以及所用缓冲液/添加剂类型将共同影响色谱柱的使用寿命。表5列出了XSelect HSS XP 2.5μm色谱柱的建议缓冲液和添加剂。
注:在pH、温度和压力限值组合条件下运行会导致色谱柱使用寿命缩短。
c. 溶剂
为了保持理想的色谱柱性能,请使用高品质HPLC级溶剂或MS级溶剂。所有水相缓冲液在使用前都应使用0.2μm滤膜过滤。含有悬浮颗粒物的溶剂常常会堵塞色谱柱入口的筛板,
这会导致柱压增大或者峰形变形。
d. 压力
XSelect HSS XP 2.5μm色谱柱兼容HPLC、UHPLC和UPLC背压。表6所示为操作压力上限。
e. 温度
XSelect HSS XP 2.5μm色谱柱只可耐受中等温度条件,以改善选择性、降低溶剂粘度和提高传质速率。
注:在极端pH、温度和压力组合条件下运行会导致色谱柱使用寿命缩短。
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