ACQUITY UPLC和ACQUITY Premier CSH色谱柱的使用

  为确保ACQUITY UPLC和ACQUITY Premier CSH色谱柱始终保持理想性能，请遵循以下原则：

a. 样品前处理

1. 样品中的杂质往往会污染色谱柱。避免污染的方法之一是在分析之前使用填充有适合填料的Oasis™固相萃取小柱/色谱柱或Sep-Pak™小柱净化样品。如需了解更多信息，请访问

www.waters。。ｃｏｍ/sampleprep。

2. 为获得理想峰形和灵敏度，优先选用运行分析时拟用的流动相或比它更弱的流动相来制备样品。

3. 如果样品不溶于流动相，请确保样品、溶剂和流动相可以混溶，以避免样品和/或缓冲盐析出。

4. 用0.2μm滤膜过滤样品，去除颗粒物质。如果用于溶解样品的溶剂含有机溶剂（如乙腈、甲醇等），请确保滤膜材料不溶于该溶剂。请联系滤膜生产商了解滤膜的溶剂兼容性。

或者，可以考虑在8000 rpm下离心样品溶液20 min，然后将上清液转移至适当的样品瓶中。

b. pH范围

有关pH范围和推荐操作温度的信息，请参见表2。

  表3列出了常用的缓冲盐和添加剂。此外，柱寿命将根据操作温度、使用的缓冲盐类型和浓度而有所不同。例如，在高温下使用pH值为8的磷酸盐缓冲液会缩短色谱柱寿命。

表2. ACQUITY UPLC和ACQUITY Premier CSH色谱柱的推荐pH和温度限值

c. 溶剂

  为了保持理想的色谱柱性能，请使用高品质色谱级溶剂。所有水相缓冲盐在使用前都应使用0.2 ­m滤膜过滤。含有悬浮颗粒物的溶剂通常会堵塞色谱柱入口筛板，这会导致操作压力增大，性能变差。有关详细信息，请参阅第V节。

d. 压力

  ACQUITY CSH色谱柱能够承受高达18,000psi（1241 bar或124 MPa）的操作压力。

注：在压力、pH和/或温度的极值下运行会缩短色谱柱使用寿命。

e. 温度

  为了改善选择性、降低溶剂粘度和提高传质速率，ACQUITY CSH色谱柱的推荐操作温度范围为不超过80℃。在高pH条件下操作时，建议降低操作温度以延长色谱柱使用寿命。在较高温度下（如70℃以上）运行也可能缩短色谱柱使用寿命。有关推荐操作温度和pH范围的更多信息见下方表2。

  注：在温度、压力和/或pH的极值下运行会缩短色谱柱使用寿命。

表3. 使用ACQUITY UPLC和ACQUITY Premier CSH色谱柱时的推荐缓冲盐