核酸(Nucleic acids)的检测
核酸是脱氧核糖核酸(DNA)和核糖核酸(RNA)的总称,是由许多核苷酸单体聚合成的生物大分子化合物,为生命的最基本物质之一。核酸是一类生物聚合物,是所有已知生命形式不可少的组成物质,是所有生物分子中最重要的物质,广泛存在于所有动植物细胞、微生物体内。
上海汉尧实验室(上海星瀚耀生物医药科技有限公司)选用YMC-Triart C18(250*4.6mm, 5um)色谱柱对核酸进行HPLC测定,检测需求。
方法来源:分析实验室自研
样品信息
中文名:胞苷酸(CMP) | 中文名:二磷酸胞苷(CDP) | 中文名:三磷酸胞苷(CTP) |
英文名:Cytidine 5'-monophosphate | 英文名:Cytidine-5'-diphosphate | 英文名:Cytidine-5'-triphosphate |
CAS号:63-37-6 | CAS号:63-38-7 | CAS号:65-47-4 |
中文名:腺苷酸(AMP) | 中文名:二磷酸腺苷(ADP) | 中文名:三磷酸腺苷(ATP) |
英文名:Adenosine 5'-monophosphate | 英文名:Adenosine 5'-diphosphate | 英文名:Adenosine 5'-triphosphate |
CAS号:61-19-8 | CAS号:58-64-0 | CAS号:56-65-5 |
色谱条件
色谱柱:YMC-Triart C18, 250*4.6mm, 5um, P/N: TA12S05-2546PTH
流动相A:70mM NaH2PO4(pH5.5)
流动相B:MeOH
检测波长:260nm;
柱 温:35℃;
进样浓度:1.0mg/ml
稀释剂:H2O
进样量:5μL
运行时间:15min
后运行时间:5min
洗脱梯度:
T(min) | MP-A% | MP-B% | Flow(ml/min) |
0.00 | 100.0 | 0.0 | 0.5 |
5.50 | 94.5 | 5.5 | 0.5 |
5.51 | 94.5 | 5.5 | 1.5 |
12.50 | 84.0 | 16.0 | 1.5 |
12.51 | 60.0 | 40.0 | 1.5 |
14.50 | 100.0 | 0.0 | 1.5 |
14.51 | 100.0 | 0.0 | 0.5 |
15.00 | 100.0 | 0.0 | 0.5 |
实验谱图和数据
样品检测谱图
样品检测数据
结论
选用YMC-Triart C18(250*4.6mm, 5um)色谱柱对核酸进行HPLC测定,通过调节流动相梯度及流速,6种核酸在同一色谱条件中可实现稳定分离,且分离度均大于1.5,符合检测需求。
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