【色谱分析】色谱小知识丨流动相制备技巧

高效液相色谱仪的分离原理主要取决于流动相和固定相的吸附和解吸附。流动相的正确配置对实验数据和分离效果至关重要，它会直接影响样品中组分的保留和转移，从而对样品的分离产生影响。因此，正确选择和配置流动相是非常重要的。本期我们就来介绍一些流动相制备方面的技巧，以帮助大家获得更优异的分离效果和更准确的分析结果。

使用简单的流动相

在HPLC分析中选择简单的流动相可以使方法更稳定且易于转移，同时在使用的过程中减少故障发生和停机。

基于重量比制备流动相

在流动相制备过程中，如果根据体积比(V/V)进行溶剂的混合，溶液体积可能会随温度的变化而变化，从而影响分离的准确性和重现性。因此最好根据重量比制备流动相，这样即使环境条件发生变化，重量比也会保持一致。

对流动相组分分别混合

当我们根据体积比制备流动相时，应该先按照相应比例分别计算流动相中各溶剂的体积，然后进行混合。通常有两种混合方式，如果先加入水，再加有机溶剂，混合溶剂的收缩会增加其浓度。如果先加入有机溶剂，再加入水，混合溶剂的收缩会降低其浓度。

使用预混合的流动相

使用预混合的流动相，这在反相色谱中比较常用，这种方式有助于避免混合过程中的温度变化，提高混合效率，使其更有效地脱气。

溶剂温度校正

基于体积比制备流动相时，首先须将溶剂置于室温条件下，确保体积的一致性和分析的重现性。这种可以通过将溶剂放入热水或冷水浴中以调整溶剂温度。

选择正确的过滤装置

在制备过程中过滤流动相时，选择正确的过滤装置是非常重要的。对于HPLC系统，建议使用孔径为0.45µm或孔径更小的滤膜；而对于UHPLC系统，滤膜孔径应小于等于0.22µm，这样可以有效地去除流动相中的颗粒，防止系统堵塞。

推荐产品：

总而言之，选择合适的制备流动相的溶剂与方式，才能确保良好的分离度和分析的重现性，为色谱工作者保驾护航。