LC-MS/MS方法 | 测定血浆中的叶酸及代谢物

2025年01月16日 10:32 来源：RESTEK 瑞思泰康科技（北京）有限公司

相关背景

Introduction

叶酸（维生素 B9）是人体必需的一种水溶性维生素，它在胎儿正常发育、红细胞形成、心血管健康、免疫系统和精神健康方面都有非常重要的作用。叶酸在人体细胞中无法合成，因此只能通过从外界摄取获得。

同时，临床中妊娠期女性的叶酸（维生素B9）状态评估非常重要，能否保证叶酸的合理摄入对孕妇及胎儿的生命和健康有着至关重要的影响。因此许多国家建议女性从怀孕前一个月或三个月时开始补充叶酸(维生素B9)。

从这种实际需求出发，Restek 基于 LC-MS / MS 平台，在 HILIC-Si 色谱柱上建立了孕妇血浆中叶酸及代谢物的检测方法，针对性地解决相关的临床诊断问题。

分析方法

以 Raptor HILIC-Si 柱测定血浆中的叶酸及代谢物，结果如下：

Restek 色谱图：LC_CF0698

色谱条件
色谱柱	Raptor HILIC-Si (货号：9310A5E)
规格	50 mm x 3.0 mm ID
粒径	2.7 µm
柱温	30 °C
标准品 / 样品
标准品 / 样品
溶剂	乙腈（20 mM 乙酸铵）：水 = 80 : 20，含 10 mg / mL 2-Mercaptoethanol
浓度	样品前处理后最终浓度 6.25 ng / mL
进样量	5 µL
流动相
A	水 : 乙腈 = 50 : 50，20 mM 乙酸铵
B	水 : 乙腈 = 20 : 80，20 mM 乙酸铵

最大压力	344 bar
检测器	MS / MS
离子化方式	ESI +
扫描模式	MRM
仪器	UHPLC
样品制备
1. 取 380 μL 含有 100μg / mL 2-Mercaptoethanol的血浆（K2EDTA，2x 活性炭处理），加入 20 μL 强化溶液。 2. 涡旋 2 分钟，以 4000 rpm 离心 2 分钟。 3. 用 1 mL 甲醇活化 EVOLUTE EXPRESS WAX 30 mg SPE板（Biotage 604-0030-PX01），然后用 1 mL 2% 甲酸）平衡。打开真空泵，将 SPE 板全干燥。 4. 将 400 μL 样品加载到 SPE 板上并施加真空。 5. 用 1 mL 水清洗 SPE 板,然后抽真空使之全干燥。 6. 以 300 μL 含 5% 氨水的甲醇（含 10 mg / mL 的 2-Mercaptoethanol）作为洗脱溶剂。启动真空泵进行洗脱。 7. 将提取物在 30°C 下氮气吹干。 8. 用 200 μL 流动相 B（含 10 mg / mL 2-Mercaptoethanol）复溶，进行上机测试。 * 注：整个样品制备过程是在昏暗的灯光下进行的。

解决方案

除此之外，Restek 还可提供同时分析多种水溶性维生素解决方案：

Restek 色谱图：LC_FF0558

资料下载

更多临床诊断、治疗药物监测应用，详见下方《Restek 生命健康领域液相解决方案》。您需要的这里都能找到哦！

向下滑动查看更多页面

您也可以点击下方按钮查阅高清原件，或移步 Restek 官微-“资料下载”-“应用方案”中下载 “Restek 生命健康领域液相解决方案” 。

关键词：色谱配件

凡本网注明“来源：化工仪器网”的所有作品，均为浙江兴旺宝明通网络有限公司-化工仪器网合法拥有版权或有权使用的作品，未经本网授权不得转载、摘编或利用其他方式使用上述作品。已经本网授权使用作品的，应在授权范围内使用，并注明“来源：化工仪器网”。违反上述声明者，本网将追究其相关法律责任。
本网转载并注明自其他来源（非化工仪器网）的作品，目的在于传递更多信息，并不代表本网赞同其观点和对其真实性负责，不承担此类作品侵权行为的直接责任及连带责任。其他媒体、网站或个人从本网转载时，必须保留本网注明的作品第一来源，并自负版权等法律责任。
如涉及作品内容、版权等问题，请在作品发表之日起一周内与本网联系，否则视为放弃相关权利。

联系我们