Kromasil液相色谱柱158|炙淫羊藿(淫羊藿)配方颗粒的特征图谱
案例说明
炙淫羊藿(淫羊藿)配方颗粒试样经25%乙醇溶液超声提取后,采用梯度洗脱,用紫外检测器测定。炙淫羊藿(淫羊藿)配方颗粒应呈现8个特征峰。
分析条件
色谱柱:Kromasil 100-5-C18,4.6x250mm (订货号:M05CLA25)
流动相:(A)乙腈 (B)0.1%甲酸溶液
按下表进行梯度洗脱:
时间/min | 流动相A(%) | 流动相B(%) |
0 | 15 | 85 |
25 | 25 | 75 |
38 | 25 | 75 |
50 | 40 | 60 |
55 | 40 | 60 |
65 | 65 | 35 |
66 | 15 | 85 |
70 | 15 | 85 |
流速:1.0mL/min
进样量:10μL
柱温:30℃
波长:270nm
分析图谱
根据上述色谱条件, 分别将参照物溶液与供试品溶液注入液相色谱仪进行测定。参照物溶液的色谱图如图1所示,色谱图积分结果见表1。
表1参照物溶液色谱图积分结果
目标物 | 保留时间 | 峰面积 | 峰高 | 理论塔板数 | 分离度 | 对称/拖尾因子 |
朝藿定C | 42.050 | 3027.357 | 112.524 | 56376 | - | 0.96 |
淫羊藿苷 | 44.433 | 11222.050 | 750.508 | 208317 | 4.34 | 0.88 |
宝藿苷Ⅰ | 63.000 | 1248.856 | 173.548 | 1873426 | 64.76 | 1.00 |
由表1中数据可知,淫羊藿苷的理论塔板数为208317,满足《炙淫羊藿(淫羊藿)配方颗粒》中规定的不应低于 1500的要求。
供试品溶液的色谱图如图2所示,色谱图积分结果见表 2
表2 供试品溶液色谱图积分结果表
目标物 | 保留时间 | 峰面积 | 峰高 | 理论塔板数 | 分离度 | 对称/拖尾因子 |
1:朝藿定A | 37.275 | 806.789 | 36.726 | 68232 | - | 1.00 |
2:朝藿定B | 39.508 | 3745.575 | 156.529 | 62959 | 3.72 | 0.96 |
3:朝藿定C | 42.250 | 1390.918 | 51.660 | 55528 | 4.07 | 0.93 |
4 | 43.717 | 697.871 | 41.937 | 152695 | 2.52 | 0.97 |
5(S):淫羊藿苷 | 44.542 | 5282.503 | 365.718 | 219949 | 1.99 | 0.91 |
6 | 59.975 | 374.647 | 39.924 | 948089 | 49.30 | 0.99 |
7 | 60.292 | 124.188 | 14.643 | 1152329 | 1.34 | 0.79 |
8:宝藿苷Ⅰ | 63.033 | 248.137 | 35.338 | 1901644 | 13.46 | 1.02 |
由图2和表2中数据可知,供试品溶液色谱图中呈现 8个特征峰,其中峰3、峰5和峰8分别与相应对照品朝藿定C峰、淫羊藿苷峰和宝藿苷I峰的保留时间相对应。按中药色谱指纹图谱相似度评价系统计算,供试品特征图谱与对照特征图谱经Mark峰相似度计算,相似度为0.959,满足《炙淫羊藿(淫羊藿)配方颗粒》中相似度不得低于 0.90的要求。
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鲲霆生物现为Nouryon旗下品牌Kromasil液相色谱柱及制备填料中国区总代理。主营业务为代理销售各类实验室精密仪器、试剂耗材以及相关领域的技术开发与咨询服务。
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