Kromasil液相色谱柱157|栀子配方颗粒的特征图谱
案例说明
栀子配方颗粒试样经50%乙醇溶液超声提取后,采用梯度洗脱,用紫外检测器检测。栀子配方颗粒应呈现6个特征峰。
分析条件
色谱柱:Kromasil EternityXT-5-C18,4.6x250mm (订货号:X05CLA25)
流动相:(A)乙腈 (B)0.4%磷酸溶液
按下表进行梯度洗脱:
时间/min | 流动相A(%) | 流动相B(%) |
0 | 8 | 92 |
10 | 16 | 85 |
15 | 20 | 80 |
20 | 25 | 75 |
40 | 30 | 70 |
流速:1.0mL/min
进样量:10μL
柱温:25℃
波长:按照下表波长变化进行设置:
时间/min | 波长/nm |
0 | 238 |
23 | 238 |
23.1 | 440 |
40 | 440 |
分析图谱
依据上述色谱条件,分别将对照品溶液和供试品溶液注入液相色谱仪,测定,即得。参照物溶液的色谱图如图1所示,色谱图积分结果见表 1。
表1 参照物溶液色谱图积分结果
目标物 | 保留时间 | 峰面积 | 峰高 | 理论塔板数 | 分离度 | 对称/拖尾因子 |
栀子苷 | 13.392 | 379.515 | 47.095 | 65169 | - | 1.00 |
由表1中数据可知,栀子苷的理论塔板数为65169,满足《栀子配方颗粒》中规定的不低于3000的要求。
供试品溶液的色谱图如图2所示,色谱图积分结果见表 2,特征峰相对保留时间结果见表3。
表2 供试品溶液色谱图积分结果表
目标物 | 保留时间 | 峰面积 | 峰高 | 理论塔板数 | 分离度 | 对称/拖尾因子 |
1 | 5.217 | 29.093 | 3.476 | 11415 | - | 1.05 |
2 | 9.442 | 33.769 | 3.068 | 14941 | 16.76 | 0.81 |
3:京尼平1-β-D龙胆双糖苷 | 10.675 | 275.844 | 36.802 | 46386 | 4.86 | 0.97 |
4(S):栀子苷 | 13.392 | 2275.562 | 288.377 | 69874 | 13.56 | 1.03 |
5 | 20.408 | 109.93 | 16.366 | 204555 | 36.64 | 1.08 |
6:西红花苷Ⅰ | 23.367 | 303.291 | 36.960 | 243737 | 16.00 | 1.41 |
表3 特征峰相对保留时间结果表
目标物 | 保留时间 | 相对保留时间测定值 | 相对保留时间规定值 | 偏差 |
1 | 5.217 | 0.390 | 0.409 | -4.65 |
2 | 9.442 | 0.705 | 0.704 | 0.14 |
3:京尼平1-β-D 龙胆双糖苷 | 10.675 | 0.797 | 0.806 | -1.12 |
4(S):栀子苷 | 13.392 | 1.000 | - | - |
5 | 20.408 | 1.524 | 1.455 | 4.74 |
6:西红花苷Ⅰ | 23.367 | 1.745 | 1.709 | 2.11 |
由表2和表3中数据可知,栀子配方颗粒供试品溶液的特征峰个数为6个,与《栀子配方颗粒》中规定的特征峰个数一致;峰1、峰2、峰3、峰5、峰6与S峰的相对保留时间分别为0.390、0.705、0.797、1.524和1.745,均在规定值的 ±8%范围之内。
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