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浅看尺寸排阻色谱柱的日常维护保养
2025年04月10日 15:12
来源：东曹（上海）生物科技有限公司
尺寸排阻色谱柱是一种基于分子尺寸差异进行分离的高效色谱柱。基于多孔性凝胶作为固定相，利用分子在凝胶孔道中的排阻效应进行分离。在色谱柱中，大分子不能渗透到凝胶孔穴中去而被排阻，较早地流出色谱柱；中等体积的分子部分渗透；小分子则能够完q渗透入凝胶孔道内，最后流出色谱柱。因此，样品分子基本按其分子大小先后流出，从而达到分离的目的。
尺寸排阻色谱柱的日常维护：
1、压力管理
避免过高压力冲击：在使用过程中，要防止样品中的颗粒杂质或聚集体进入色谱柱，造成堵塞，从而导致柱压突然升高。样品在进样前必须经过适当的过滤和离心处理，例如使用0.45μm或更小孔径的滤膜过滤，对于容易产生聚集体的样品，可以采用高速离心的方法去除大颗粒杂质。
压力监测：定期观察色谱柱入口处的压力，最好安装压力传感器进行实时监测。如果发现压力有逐渐升高的趋势，可能是色谱柱部分堵塞或者填料有轻微变化的迹象。此时应尽快采取措施，如用合适的溶剂进行冲洗，以恢复压力正常。
2、温度控制
温度稳定性：尺寸排阻色谱柱对温度较为敏感，尤其是一些具有温度敏感性的填料。在使用过程中，应确保色谱柱所处的环境温度稳定，避免温度波动过大。例如，将色谱柱安装在带有恒温功能的色谱仪柱温箱内，设置合适的温度，并且保证柱温箱的温度精度在±0.5℃以内。
避免高温损伤：在较高温度下操作时，要按照色谱柱的使用说明书规定的最高温度限制进行，防止填料的结构因高温而遭到破坏。同时，在停止使用后，应让色谱柱逐渐降温至室温，避免因快速降温导致填料收缩不均匀，影响柱效。
3、流动相管理
溶剂纯度与兼容性：使用的流动相溶剂必须是高纯度的，并且要与色谱柱填料兼容。低纯度的溶剂可能含有杂质，这些杂质会在色谱柱内积累，影响分离效果。例如，对于以水为流动相的系统，应使用超纯水，并定期更换新鲜的溶剂。
溶剂过滤与脱气：流动相溶剂在使用前要经过0.45μm或更小孔径滤膜的过滤，以去除其中的颗粒杂质。同时，要对溶剂进行脱气处理，因为溶剂中的气泡会引起检测器噪声增加、保留时间重复性差等问题。常用的脱气方法有超声脱气、氦气鼓泡脱气等。
流动相组成调整：避免频繁地大幅度改变流动相的组成，因为这种变化可能会导致色谱柱填料的溶胀或收缩，影响柱效和分离效果。如果需要改变流动相组成，应采取渐进的方式，例如通过梯度洗脱程序缓慢地改变流动相的比例。
关键词：
尺寸排阻色谱柱
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