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一文与您分享选择SEC色谱柱时所需要考虑的关键因素

2025年04月21日 14:48 来源:岛津(上海)实验器材有限公司 SGLC
  SEC色谱柱是利用多孔填料形成固定相,大分子因无法进入孔隙而快速通过,小分子则扩散进入孔隙,路径延长导致洗脱延迟,按分子体积从大到小顺序洗脱。该产品具有温和分离特性,可保持生物分子活性,广泛应用于蛋白质、多糖、聚合物等生物大分子分析。
 
  在选择适合的SEC色谱柱时有几个关键因素需要仔细考量,以确保获得良好分离效果和实验结果。下面咱们来一起了解一下吧:
 

 

  1、孔径大小
 
  柱内的填料颗粒具有孔结构,这些孔决定了哪些分子可以通过而哪些会被排除在外。因此,选择正确的孔径对于目标分子的有效分离至关重要。一般来说,如果要分析较大分子如蛋白质或多糖,则需选用孔径较大的填料;而对于较小分子量的化合物,则应选择孔径较小的填料。通常情况下,供应商会提供推荐的分子量范围作为参考。
 
  2、柱长与内径
 
  柱长影响着分离效率和分辨率。较长的柱子能够提供更高的理论塔板数,从而改善分辨率,但同时也会增加运行时间和溶剂消耗。相反,较短的柱子则适合快速筛选或低分辨率需求的应用。至于内径,它关系到样品加载量以及检测灵敏度。较大的内径允许更大的样品体积,但可能会降低灵敏度;较小的内径则有利于提高检测灵敏度,但对进样量有限制。
 
  3、填料材质
 
  不同的应用场合可能要求使用不同类型的填料材料。常见的有聚苯乙烯-二乙烯基苯共聚物(PS-DVB)和琼脂糖等。PS-DVB适合于有机溶剂体系中的小分子分离,而琼脂糖更适合水相体系中的生物大分子分离。此外,还需注意填料是否经过表面修饰,比如亲水性改性可以减少非特异性吸附,特别适用于蛋白质等易变性的样品。
 
  4、兼容性与稳定性
 
  考虑到实际操作环境,它必须与所使用的流动相兼容,并且能够在预期的工作温度范围内保持稳定。例如,在高温条件下工作的系统中,需确认是否能在该温度下正常工作而不损坏。另外,对于含有缓冲盐或其他添加剂的流动相,也需要检查色谱柱是否能耐受。
 
  综上所述,在选购SEC色谱柱时应当综合考虑上述各个方面的需求,结合自身的实验条件和目标,挑选出适合自己研究项目的产品。这不仅有助于提升实验的成功率,还能延长使用寿命。

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