Q33226——Thermo Qubit4 荧光计（Qubit 4 Fluorometer）用户指南

Q33226——Thermo Qubit4 荧光计（Qubit 4 Fluorometer）用户指南

——精准、高效、多功能的核酸与蛋白质定量解决方案

一、产品概述

Qubit 4 荧光计（货号：Q33226）是赛默飞世尔科技（Thermo Fisher Scientific）推出的新一代台式荧光定量仪，专为精准测量DNA、RNA和蛋白质浓度设计。其核心参数如下：

• 检测范围：10 pg/μL DNA、12.5 μg/mL 蛋白质（1 μL样本量）

• 检测时间：<3秒/样本（DNA/RNA/蛋白质），<5秒/RNA完整性（RNA IQ法）

• 动态范围：5个数量级

• 光源：蓝光LED（470 nm）、红光LED（635 nm）

• 激发/发射滤光片：蓝光（430–495 nm激发，510–580 nm发射）、红光（600–645 nm激发，665–720 nm发射）

• 检测器：光电二极管（300–1000 nm）

• 显示与存储：5.7英寸彩色触摸屏，最多存储1000个样本数据

• 连接性：USB、WiFi、U盘

二、技术优势

1. 高灵敏度与特异性

• 荧光染料：仅与目标分子（DNA、RNA、蛋白质）结合后发射荧光，避免游离核苷酸或降解核酸的干扰。

• 低浓度检测：可精确检测低至10 pg/μL的DNA和12.5 μg/mL的蛋白质，适用于珍贵或低浓度样品。

2. 快速与便捷

• RNA IQ法：5分钟内完成RNA完整性和质量检测，较传统微流体芯片法（如Agilent 2100）缩短85%时间。

• 操作简化：仅需将样品加入工作液，混合后放入仪器检测，无需复杂预处理。

3. 多功能与扩展性

• 内置试剂计算器：自动计算所需染料和缓冲液用量，减少人为误差。

• 个性化检测：支持MyQubit软件自定义检测程序，可定量胆固醇、葡萄糖等小分子。

4. 数据管理与导出

• 多语言界面：支持中、英、法、德等7种语言。

• 数据传输：通过USB、WiFi或U盘导出数据，兼容Thermo Fisher Connect云平台。

三、操作指南

（一）实验前准备

1. 设备检查

• 确保仪器放置在平稳、干燥的台面上，避免阳光直射。

• 检查电源适配器、USB驱动器（4 GB）、屏幕擦拭布是否齐全。

2. 试剂准备

• 使用Qubit试剂盒（如dsDNA HS、RNA IQ等），按说明书稀释工作液。

• 确保试剂在有效期内（6个月内），且避光保存。

3. 样本准备

• DNA/RNA/蛋白质样本需纯化，避免盐类、酚类等抑制剂干扰。

• 样本量建议1–20 μL，浓度超出范围时可稀释后检测。

（二）实验操作

1. 开机与预热

• 连接电源适配器，按下电源键，预热时间<35秒。

2. 选择检测程序

• 触摸屏选择对应试剂盒类型（如dsDNA HS、RNA IQ）。

• 如需自定义检测，使用MyQubit软件创建.qbt文件并上传。

3. 样本检测

• 将样本加入工作液，混合后转移至Qubit检测管。

• 将检测管放入仪器，点击“Read Tube”，3–5秒后显示结果。

4. 数据记录与导出

• 结果显示浓度值（ng/μL或μg/μL）及质量评分（如RNA IQ#）。

• 通过USB或WiFi导出数据至Excel或Thermo Fisher Connect。

（三）实验后维护

1. 清洁与消毒

• 使用屏幕擦拭布清洁触摸屏，避免液体接触仪器内部。

• 检测管可高压灭菌或75%乙醇消毒。

2. 长期存放

• 长期不使用时，关闭电源并覆盖防尘罩。

四、使用技巧与高效操作

1. 样本优化

• DNA/RNA：建议浓度范围10–1000 pg/μL（DNA）或0.5–1.5 μg/μL（RNA）。

• 蛋白质：使用BCA法或Bradford法预估浓度，避免过高导致荧光淬灭。

2. RNA完整性检测

• RNA IQ法区分完整RNA（RNA IQ# >7）与降解RNA（RNA IQ#<4），适用于qPCR或NGS实验前的质量评估。

3. 多通道检测

• 可同时运行多个检测程序（如dsDNA HS与RNA IQ），提高通量。

五、注意事项

1. 安全规范

• 避免接触荧光染料，如不慎接触，立即用大量清水冲洗。

• 仪器仅供科研使用，不可用于临床诊断。

2. 操作细节

• 确保检测管无气泡，否则可能导致读数偏低。

• 避免在高温或高湿环境下使用，可能影响荧光信号。

3. 故障排除

• 结果异常：检查试剂是否过期、样本是否稀释过度。

• 仪器无响应：重启仪器，如仍无法解决，联系技术支持。

六、用户评价与支持

• 用户反馈：

• “Qubit 4的RNA IQ法显著缩短了RNA质量评估时间，为NGS实验节省了大量成本。”

• “内置试剂计算器极大减少了人为误差，适合高通量实验室。”