Waters Styragel色谱柱的使用指南

Waters Styragel色谱柱的使用指南

本章介绍了：

■ 色谱指南

■ 色谱柱校准

a.色谱指南

凝胶渗透色谱柱的使用寿命有限，并且与其保养和使用状况直接相关。样品和洗脱剂的污染、频繁的溶剂更换、操作和储存方法不当以及温度循环都会缩短色谱柱寿命。

色谱柱使用指南

使用Waters Styragel色谱柱时，请遵守下列准则：

■ 为获得最佳的分离度和最长的色谱柱寿命，各色谱柱的流速不得超过1.0 mL/min或反压超过3.5 MPa（500 psi，35 atm，以系统反压作校正）。

■对于溶剂高效色谱柱，为获得最佳的分离度和最长的色谱柱寿命，各色谱柱的流速不得超过0.3 mL/min或反压超过3.5 MPa（500 psi，35 atm，以系统反压作校正）。这些色谱柱的正常流速为0.3 mL/min。

■ 对色谱柱采取适当保护，防止振动和机械冲击。

■ 最大限度减少温度循环。

■ 防止溶剂组分快速改变而引起的色谱柱压力迅速变化。

■ 更换为不同粘度的溶剂时，可能需要调节流速，从而使各色谱柱的反压低于操作反压指标3.5 MPa（500 psi，35 atm）。

■ 将样品溶解在流动相中，避免沉淀。

■ 请始终使用高质量的HPLC级溶剂。

■ 单个色谱柱最好用于特定应用。频繁切换样品和溶剂会加速色谱柱退化和分离度的下降。

b.色谱柱校准

只要更换了完整色谱柱组中的一根色谱柱，就应重新生成校准曲线，保证应用的重现性。图2、图3和图4显示了一系列色谱柱的典型校准曲线。此校准曲线由聚苯乙烯标准品获得。