细胞培养小室配套24孔板怎么使用
细胞培养小室配套24孔板怎么使用
使用细胞培养小室配套的24孔板时,首先需要选择合适的小室型号,根据共培养的形式选择悬挂式或站立式。如果需要在细胞培养板上也种细胞,则应使用PET悬挂式小室。在进行反面种细胞时,要注意不要使培养基干掉,以免影响细胞贴壁和存活。共培养的细胞密度不宜过多,一般控制在10^3cells/cm^2左右,具体密度需要根据细胞类型和培养时间通过预实验来确定。
在选择和使用24孔无菌带盖细胞培养板时,可以考虑以下几个方面:
材质:细胞培养板通常由聚苯乙烯(PS)或聚丙烯(PP)制成。PS材质透明度好,便于观察细胞生长情况,但对一些化学物质敏感;PP材质相对更耐化学物质的腐蚀。
表面涂层:某些细胞需要特定的表面涂层才能良好附着和生长,例如用于培养干细胞的板可以采用具有特殊表面涂层(如gelatin、laminin等)的产品。
孔数和布局:根据实验需求选择合适数量的孔数。24孔是一种常见尺寸,适用于许多实验室应用。同时要考虑每个孔之间的间距是否足够以避免交叉感染。
无菌性:确保所选产品是经过无菌处理并包装密封完好。在使用前检查包装是否完好,并通过在无菌条件下打开包装来验证其无菌性。
盖子类型:可选择有透明盖或密封的盖子。透明盖方便观察细胞生长情况,而密封的盖子可以提供更好的气体和湿度控制。
在使用24孔板时,为了确保细胞铺匀,可以采用以下方法:
对于96孔板,每孔加入100微升细胞悬液,从孔的左边靠近底部加入,加完半边板后,将未加的细胞悬液混一下再继续加剩余的半边板子。加完后轻轻敲击板的边缘,注意力度和次数,以避免细胞集中成堆。
对于6孔板、12孔板或24孔板,可以先加入少量无血清培养基到各个孔中,晃动浸润整个孔底,然后用移液枪吸至第二孔,同样方法浸润孔底,其他孔依次类推,以确保细胞悬液平铺在整个孔底,细胞分散较均匀。最重要的是,在使用过程中要保持严格的无菌操作,避免污染,并遵循相关安全操作规定,参照生产商提供的说明书和建议进行正确使用。
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