细胞爬片的特点、注意事项及操作步骤

　　细胞爬片的特点、注意事项及操作步骤

　　爬片又名细胞爬片，是指让玻片浸在细胞培养基内，细胞在玻片上生长，主要用于组织学，免疫组织huaxue，冰冻切片，细胞涂片，原位杂交等。

　　特点：

　　1.玻片表面经过TC处理，双面均可使用.

　　2.γ射线灭菌,保证无菌.

　　3.使用便捷,只需打开包装,将爬片放入孔板内,将细胞悬液滴到爬片上即可培养.

　　4.爬片厚度为0.17mm,直径为8mm/14mm/20mm/25mm.分别适用于48孔细胞培养板/24孔细胞培养板/12孔细胞培养板/6孔细胞培养板

　　5.吸附：该玻片表面具有持久的阳离子电荷,可以通过静电作用吸附冰冻切片组织或细胞,使之粘附在玻片上,进而在玻璃和切片组织之间形成共价键.因此，无需粘黏剂或者蛋白包被，该玻片也能牢固的粘附切片或细胞。

　　操作注意事项：

　　使用细胞爬片时(比如在六孔板中放入爬片,六孔板的孔底面积往往会比爬片面积多出一部分,加细胞悬液时常常就是细胞铺满整个孔底,有时细胞生长边集现象,就是靠近壁边缘密度要高些,这样处于中央玻片上爬的细胞数量就可能相对较少)

　　比较好的做法是将玻片放入孔板的孔内后,加细胞悬液时只滴到玻片上,一直滴到液体布满整个玻片又不会溢出玻片边缘(因为液体表面张力作用可以很容易做到这一点。),放在培养箱里,等细胞贴壁后,取出,再滴加培养基布满整个孔底,继续培养,这样玻片上的细胞生长的密度就会很集中。

　　保存方式：

　　细胞爬片有三层包装,在超净台无菌的状态下打开包装.未用完的爬片按原先包装方式再包装起来即可。

　　注：

　　该爬片表面带有正电荷,请勿用手触摸,以免使用效果不佳。

　　玻片经过γ射线灭菌后,透明玻片颜色会略变为淡茶色,属正常现象。

　　操作步骤：

　　爬片的准备

　　1、在超净台内，使用75%乙醇擦拭外包装铝箔袋

　　2、拆开铝箔袋，取出内置器皿后，用尖镊将内置爬片取出放入所用或培养皿内。

　　种植细胞

　　1、用胰酶消化好细胞，充分吹打，使之成单细胞悬液(注意：这一点很重要，关系到将来爬出来片子的质量)

　　2、种植细胞时，根据玻片的大小，先在每个孔里准备放爬片的位置滴少量培养基，目的是使玻片与培养皿靠培养基的张力粘合到一起，然后放玻片，防止加细胞悬液时玻片漂起，造成双层细胞贴片。整个过程注意无菌操作。

　　3、根据自己的需要选择合适的细胞密度种入培养板内即可

　　注意事项

　　1、使用细胞爬片时，(比如在6孔板钟放入爬片，6孔板的孔底面积往往比爬片面积多出一部分，加细胞悬液时，常常就是细胞铺满整个孔底，有时，细胞生长边集现象，就是靠近壁边缘细胞密度要高一些，这样处于中央细胞爬片上的细胞数量相对较少)，比较好的做法是，将爬片放入孔内后，加细胞悬液时，只滴到爬片上，一直滴到液体布满整个爬片，但又不易溢出爬片边缘，放到培养箱里，等细胞贴壁后，取出，再滴加培养基布满整个孔底，继续培养，这样爬片上的细胞生长的密度就会很集中。

　　2、细胞放到爬片上，之后加任何试剂，都应沿培养板板壁少量一点点倒入液体，直到细胞被液体淹没，尽量不要把细胞冲到细胞爬片以外!

　　3、爬片表面带有正电荷，请勿用手触摸，以免效果不佳!

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