血清25-羟基维生素D2和D3检测 同位素稀释液相色谱串联质谱法
引言
Restek
维生素 D 是一种脂溶性维生素,它对维持人体钙、磷代谢平衡起着重要作用。维生素 D 以维生素 D2 和维生素 D3两种形式存在,它们分别经过代谢形成 25-羟基维生素 D2 和 D3,这两种代谢物是评估维生素 D 代谢的生物标志物。
缺乏维生素 D 会导致钙吸收障碍,从而引发骨质疏松、肌肉无力、骨折等健康问题,因此临床实践中对维生素 D 的检测需求急剧增加。
对此,2024 年 5 月,国家卫健委发布了卫生行业新标准《血清 25-羟基维生素 D2 和 D3 的检测同位素稀释液相色谱串联质谱法》,该标准将于 2024 年 11 月 1 日起实施!
01
Restek 解决方案
该标准中推荐的色谱柱为五氟苯基柱或 C18。由于 25-羟基维生素 D2 和 D3 的差向异构体( 3-EPI-25-羟基维生素 D2 和 D3),对 25-羟基维生素 D2 和 D3 的总浓度有显著贡献,而这两种差向异构体的生物活性远低于主要代谢物;因此,必须在色谱上将 25-羟基维生素 D2/ D3 与它们的差向异构体分离,才可以避免维生素 D 检测水平偏高问题的出现。
使用 C18 色谱柱的限制主要是:生物标志物及其差向异构体不能全分离或分析时间比较长。Raptor PFPP 可以在 5 分钟内全分离维生素 D 的生物标志物和差向异构体,因此是这个应用的更好选择。
Restek 色谱图 LC_CF0644
色谱条件 | |
色谱柱 | Raptor FluoroPhenyl (cat.# 9319A1E) |
规格 | 100 mm x 3 mm ID |
粒径 | 2.7 μm |
柱温 | 30 ℃ |
样品 | |
溶剂 | 水 : 甲醇 = 50 : 50 |
浓度 | 25-50 ng/ mL |
进样量 | 5 μL |
流动相 | A:水(0.1% 甲酸) B:甲醇 |
时间(min) | 流速(mL/min) | %A | %B |
0.00 | 0.6 | 25 | 75 |
4.00 | 0.6 | 15 | 85 |
4.10 | 0.6 | 0 | 100 |
5.00 | 0.6 | 0 | 100 |
5.01 | 0.6 | 25 | 75 |
7.00 | 0.6 | 25 | 75 |
检测器 | MS/MS |
离子化方式 | ESI+ |
扫描方式 | MRM |
仪器 | HPLC |
02
产品咨询 & 试用
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