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Kromasil液相色谱柱156|木蝴蝶配方颗粒的特征图谱 高效液相色谱法

2025年02月19日 16:51 来源:上海鲲霆生物科技有限公司


案例说明

木蝴蝶配方颗粒试样经50%甲醇溶液超声提取后,采用梯度洗脱,在276nm处用紫外检测器检测。木蝴蝶配方颗粒应呈现6个特征峰。

 

分析条件

色谱柱:Kromasil EternityXT-5-C184.6x250mm (订货号:X05CLA25

流动相:(A)乙腈        B0.2%醋酸溶液

按下表进行梯度洗脱:

时间/min

流动相A%

流动相B%

0

12

88

5

17

83

30

28

72

55

90

10

60

100

0

 

流速:0.8mL/min

进样量:5μL

柱温:25

波长:276nm

 

分析图谱

依据上述色谱条件,分别将参照物溶液与供试品溶液注入液相色谱仪进行测定。参照物溶液的色谱图如图1所示,色谱图积分结果见表1

 

KTYY-LC-156-木蝴蝶配方颗粒的特征图谱-图1参照物.png


 

1 参照物溶液色谱图积分结果

目标物

保留时间

峰面积

峰高

理论塔板数

分离度

对称/拖尾因子

(S)木蝴蝶苷B

22.017

1246.602

109.209

88079

-

1.09

黄芩苷

27.258

1942.420

154.767

114402

16.94

1.22

黄芩素

42.025

3238.073

479.282

969814

59.91

1.17

由表1中数据可知,木蝴蝶苷B的理论塔板数为88079,满足《木蝴蝶配方颗粒》中规定的不低于5000的要求。

 

供试品溶液的色谱图如图2所示,色谱图积分结果见表2,特征峰相对保留时间结果见表3

 

 

KTYY-LC-156-木蝴蝶配方颗粒的特征图谱-图2供试品.png


2 供试品溶液色谱图积分结果

目标物

保留时间

峰面积

峰高

理论塔板数

分离度

对称/拖尾因子

1(S):木蝴蝶苷B

22.075

2874.583

253.552

88626

-

1.06

2:黄芩苷

27.358

892.094

70.761

116014

17.11

1.20

3

29.242

3709.902

299.830

132348

5.86

1.04

4

34.292

485.051

36.283

156500

15.12

1.13

5:黄芩素

42.058

1154.274

170.798

963689

29.99

1.15

6

47.000

423.885


59.950

1088085

28.12

1.12

 

3 特征峰相对保留时间结果表

目标物

保留时间

相对保留时间测定值

相对保留时间规定值

偏差

1(S):木蝴蝶苷B

22.075

-

-

-

2:黄芩苷

27.358

1.24

1.26

-1.59

3

29.242

1.32

1.34

-1.49

4

34.292

1.55

1.60

-3.13

5:黄芩素

42.058

1.91

2.06

-7.28

6

47.000

2.13

2.30

-7.39

 

由表2和表3中数据可知,木蝴蝶配方颗粒供试品溶液的特征峰个数为6个,与《木蝴蝶配方颗粒》中规定的特征峰个数一致;峰2、峰3、峰4、峰5、峰6S峰的相对保留时间分别为1.241.321.551.912.13,均在规定值的

±8%以内。



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